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分子荧光光度计结构

2017-12-08 16:27:09来源:港东科技浏览数:

分子荧光光度计

分子荧光光度计结构。众所周知,内需扩大和消费升级将是我国分子荧光光度计市场发展的最大动力。并且,一直以来,大家对于“分子荧光光度计结构”这个问题关注已久,希望了解更多分子荧光分光光度计厂家的资讯。因此,港东科技资深编辑就从专业角度来讲述相关的内容。

分子信标技术是荧光分析方法在DNA检测领域的又一延伸。分子信标的概念是1996年由Tyagi等提出的。分子信标是一段与特定核酸互补的DNA探针,空间结构上呈“发夹”结构,其中环序列是与靶DNA互补的探针;茎的一端连接上一个荧光分子,另一端连上一个淬灭分子。当靶序列不存在时,分子信标呈“发夹”结构,茎部的荧光分子与淬灭分子非常接近(7~10nm),荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收,此时检测不到荧光信号;当有靶序列存在时,分子信标的环序列与靶序列特异性结合,形成稳定的双链体线性结构,此时荧光分子与淬灭分子分开,产生可被检测的荧光信号。分子信标技术具有背景信号低、灵敏度高、特异性强等优点,在DNA检测中有着广阔的应用前景。目前,分子信标技术已应用于PCR靶标的实时荧光定量检测。Perlette等在袋鼠肾细胞质中注入分子信标,实时检测了活细胞中的RNA及RNA/DNA杂交过程。通过选择不同的荧光分子-淬灭分子对,可设计出多色分子信标,荧光系统检测到不同颜色的荧光,可实现多个靶序列的同时检测。另外,可利用金表面对荧光的淬灭作用,将荧光标记的“发夹”分子固定在金表面,没有靶序列时荧光被金表面淬灭,有靶序列杂交后产生荧光。

分子的激发单重态与相应的三重态的区别在于电子自旋方向不同,且三重态的能级稍低一些。磷光辐射的能盆比荧光更小,亦即磷光的波长比荧光更长。因为分子在激发三重态的寿命较长,所以磷光发射比荧光更迟,需要10-4一10s,或更长的时间。由于荧光物质分子与溶剂分子间相互碰撞等因素的影响,处于激发三重态的分子常常通过无辐射过程失活回到基态,因此在室温下很少呈现磷光,只有通过冷冻或固定化从而减少外转换才能检测到磷光,所以磷光法不如荧光分析法普遍。

荧光分析技术是一种强大的分析手段,广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,是多功能酶标仪的重要应用,如TECAN(M1000、M200等),Thmeral(Varioskan Flash),Bio-tek(Synergy 4等),MD(M2、M5)都可以应用于荧光检测。由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分,分子荧光为带光谱,原子荧光为线光谱,通常所说的荧光为分子荧光。通过测定所发射荧光的特性和强度,可以对物质进行定性、定量分析。荧光强度与荧光物质的浓度成正比,这是荧光分析法是量分析的依据。在生物学上的应用非常广泛,可以进行生物大分子定量,酶活性分析,荧光免疫分析,细胞学分析(细胞增殖,细胞毒理,细胞吸附等)和分子间相互作用。

荧光寿命与物质所处微环境的极性、黏度等有关,可以通过荧光寿命分析直接了解所研究体系发生的变化。荧光现象多发生在纳秒级,这正好是分子运动所发生的的时间尺度,因此利用荧光技术可以“看”到许多复杂的分子间作用过程,例如超分子体系中分子间的簇集、固液界面上吸附态高分子的构象重排、蛋白质高级结构的变化等。荧光寿命分析在光伏、法医分析、生物分子、纳米结构、量子点、光敏作用、镧系元素、光动力治疗等领域均有应用。

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